DNA分子杂交技术是互补的核苷酸序列通过Watson-Crick碱基配对形成稳定的杂合双链DNA分子的过程。

杂交的双方是所使用探针和要检测的核酸。该检测对象可以是克隆化的基因组DNA,也可以是细胞总DNA或总RNA。根据使用的方法被检测的核酸可以是提纯的，也可以在细胞内杂交， 即细胞原位杂交。探针必须经过标记，以便示踪和检测。使用最普遍的探针标记物是同位素, 但由于同位素的安全性，近年来发展了许多非同位素标记探针的方法，多使用甾类化合物地高辛配基标记。