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层析柱原理和使用方法

时间:2024-11-30 04:54:38 浏览量:

一,原理

柱层析操作时,先在圆柱管中填充不溶性基质,形成一个固定相。将样品加到柱子上,用特殊溶剂洗脱,溶剂组成流动相。在样品从柱子上洗脱下来的过程中,根据样品混合物中各组分在固定相和流动相中分配系数不同,经多次反复分配将组分分离。

柱层析法

二,使用方法

从天然产物中提取、分离和表征生物小分子,是新药研发中获得先导化合物的主要途径之一。层析法(Chromatography)是天然产物分离较为常用的方法之一。 层析法较早是根据化合物颜色分离一些植物色素,如今,层析法已经演变成为一种高度敏感的、有效的化合物分离和鉴定方法。柱层析一般包括常压柱层析、中压柱层析和高压柱层析。按照柱填料又可分为柱层析硅胶、离子交换层析、凝胶渗透色谱、疏水作用色谱等,其中以柱层析硅胶(正/反相)使用较为为广泛。与其他层析方法相比,柱层析具有操作简单,经济实惠 ,样品承载量大等优点,是天然产物分离纯化的方法之一。

层析柱是凝胶层析技术中的主体,一般用玻璃管或有机玻璃管。根据样品混合物中各组分在固定相和流动相中分配系数不同,从而分离的一种层析法。柱层析技术(chromatography) 又称柱色谱技术,主要原理是根据样品混合物中各组分在固定相和流动相中分配系数不同,经多次反复分配将组分分离开来。

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