loading buffer是什么作用

核酸电泳中loading buffer的作用：

（1）指示作用：内含剂溴酚蓝和二甲苯氰，显示电泳的进程，以便适时终止电泳；

（2）沉降样品：成分甘油可以加大样品密度，使沉到点样孔中防止样品飘出；

（3）变性聚合酶：SDS主要是促使聚合酶变性，避免其结合在DNA双链上影响迁移速率。

loading buffer在蛋白电泳中的作用：

（1）溴酚蓝指示电泳位置、使样品沉入点样孔；

（2）内含还原剂破坏二硫键，而不会破坏蛋白质的一级结构，不影响WB检测，因为WB主要只是测蛋白表达量，而不需要蛋白的高级结构；

（3）使SDS与蛋白按比例结合，使蛋白表面均匀带上负电荷

（4）煮沸使蛋白酶失活，中止酶促反应，防止提取的蛋白质降解；

（5）煮沸使DNA充分打断变性；。