辅基包括底物和什么

辅酶。

由于辅酶在酶催化反应中其化学组分发生了变化，因此可以认为辅酶是一种特殊的底物或者称为“第二底物”。

辅基与酶不能分开。酶失去了辅基就无法实现它的功能，失去了活性。离开了酶辅基也无法单独存在。底物纯粹是酶催化反应的反应物。

酶和酶作用底物

（一）酶的要求：

一个酶蛋白分子每分钟可催化10 3 ～10 4 个底物分子转变成有色产物。用于标记的酶应符合：

1.酶的活性要强，催化反应的转化率高，***高。

2.酶催化底物后产生的产物易于判断或测量，方法简单易行、敏感和重复性好。

3.作用专一性强 ，酶活性不受样品中其他成分的影响，受检组织或体液中不存在与标记酶相同的内源性酶或抑制物。用于均相酶免疫测定的酶还要求当抗体与酶标抗原结合后，酶活性可出现抑制或激活。

4.易与抗体或抗原偶联 ，标记后酶活性保持稳定，且不影响 标记抗原与抗体的免疫反应性 。

5.酶、辅助因子及其底物对人体无害 ，酶的底物易于配制、保存，酶及其底物应价廉易得。

（二）常用的酶

1.辣根过氧化物酶（HRP）：

目前酶联免疫吸附试验中应用最广泛 的标记用酶。

由无色的糖蛋白(主酶)和亚铁血红蛋白(辅基)结合而成的复合物。

辅基是酶活性基团 ，而主酶则与酶活性无关 ，HRP的***用RZ(HRP分别在403nm和275nm处的吸光度比值)表示，RZ值应大于3.0 。

RZ值仅说明血红素基团在HRP中的含量 ，并非表示HRP制剂的真正***，而且RZ值高的HRP并不意味着酶活性也高，RZ值与酶活性无关 。

酶活性以单位U表示： 即1分钟将1μmol底物转化为产物所需的酶量。酶变性后，RZ值不变但活性降低 ，因此使用酶制剂时，酶活性单位比RZ值更为重要。

辅基 辅基(prosthetic group) 酶的辅因子或结合蛋白质的非蛋白部分，与酶或蛋白质结合的非常紧密，用透析法不能除去。按照化学组成，酶可以分为 简单蛋白质 和 结合蛋白质 两大类。胃蛋白酶、核糖核酸酶等一般水解酶属于简单蛋白质，这些酶只由氨基酸组成，此外不含其它成分。转氨酶、乳酸脱氢酶及其他氧化还原酶等均属于结合蛋白质。这些酶除了蛋白质组分外，还含有一对热稳定的非蛋白的小分子物质，前者称为酶蛋白，后者称为辅因子。酶蛋白与辅因子单独存在时，一般无催化能力，只有二者结合成完整的分子时，才具有活力，此完整的酶分子称为全酶。 因此生物体内有些蛋白由蛋白质和非蛋白质两部分组成。其中较小的非蛋白质部分称辅基。如全酶包括酶蛋白质和辅基（或辅酶）二部分，辅基与酶蛋白结合较牢固。辅基可以是有机化合物，如糖类、脂肪和核酸；也可以是金属离子或金属配位化合物，如铜（Ⅱ）是铜蓝蛋白的辅基，血红素是血红蛋白的辅基等。 因为辅基是与酶蛋白共价结合的金属离子或一类有机化合物，所以用透析法不能除去。辅基在整个酶促反应过程中始终与酶的特定部位结合。 例如细胞色素氧化酶的铁卟啉。